奔驰宝马官方网站

临床应用

Clinical application

PCR是如何将新冠病毒检测出来的?
作者:奔驰宝马官网 时间:2020-03-11 10:35:53 浏览数:1447

2020年初,新冠肺炎来袭,人类正在经历着历史上最大的浩劫。新冠肺炎发生初期,大部分人不知道这是一种类似2003年非典型性肺炎病毒入侵,直到生物学、细胞学、病毒学等专家利用仪器和专业判断确认了这次肺炎正是一种以新型冠状病毒命名的病毒性肺炎。至此,人们对此次病毒的临床治疗才有了突破性的发展。

那么,新型冠状病毒是如何被检测查出来的?

1、 新冠病毒的检测流程

众所周知,新冠病毒有14天左右的潜伏期,因此最有效的方法即是对密切接触者以及有新冠肺炎症状的疑似患者进行病毒核酸检测,将传染杜绝于起始才是保护健康人群最有力的方法。

疑似患者将被采取咽拭子样本,送到检验医学中心,实验室内会为核酸检测准备4个区域,分别是试剂准备区、样本准备区、扩增区、扩增产物分析区。

其中试剂准备区负责接收患者样本,样本准备区则负责进行对样本的核酸进行提取,扩增区则是扩增复制核酸样本,扩增后分析区就是分析样本内核酸能能否与标准样配对,通过仪器检测的到,就判断成阳性,如果检测不到就是阴性。

PCR(聚合酶链式反应)实验室又叫基因扩增实验室,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测新型冠状病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。

2、新冠病毒是如何被检测为阳性的?

如上所说,疑似患者被采集了咽拭子样本之后,将利用PCR进行试验分析。具体原理通俗的讲是这样的。

“新冠病毒阳性”要确认这一点,必须从样本(比如痰、汗液、血液、粪便等等)里提取出完整的病毒。在这次疫情暴发之初,我们有听到一些新闻所谓“分离出病毒株”,大概指的就是这个。这个操作挺麻烦的,并且不是每一次都能分离成功。只能作为“确实有病毒在这里”的绝对证据。但作为给患者的检测,既慢,又不够准确。因此,现在我们听到更多的,是“新冠病毒核酸检测阳性”。所谓“新冠病毒核酸检测阳性”,又是怎么来的呢? 首先,提取样本。就是把痰啊、咽拭子采到的东西啊、粪便啊等等,先想办法收起来,拿到实验室把样本里面的核酸(就新冠病毒而言,指RNA)提取出来。RNA提取之后,降解速度非常快。因此,其实我们需要把RNA再对应的转成为cDNA。接下来的过程,本质叫做PCR(聚合酶链式反应)。大致意思就是用特别的标签,把新冠病毒最特征的那一段信息(原本是RNA信息,此时已经对应转换成为cDNA信息)给识别出来。不只是识别,这个过程是在识别的基础上,反复的复制这一段。那么经过一段时间,原来在样本里只有一点点的信息,就被扩增到很多了,也就容易查到了。

检测用到的,叫做realtimePCR。就是说病毒的核酸信息每一次被复制都会被记录下来。这样检测更准确。并且,理论上说,甚至可以推断出样本里面的病毒核酸的密度。如果样本里面没有病毒核酸,那么那个寻找病毒信息的标签,就永远也找不到落点。这时候当然不可能有任何东西被复制出来,那么检测结果就是阴性。如果样本里面有病毒核酸,那么标签就可以找到它,并且复制它,然后发出信号告诉检测者:这里有病毒。这,就是核酸检测阳性。

3、假阴性是怎么回事?

还有一种情况,很多患者被试验初期出现假阴性的情况,即实验出现了偏差。如果标签的灵敏度不够,会出现找不到病毒核酸的情况。这也会造成检测的假阴性。 某些患者检测若干次都是阴性,最后才发现是阳性,简单来说,就是有可能是取样的时候没有取到病毒最多的地方,或者当时患者体内的病毒确实不多,或者检测的试剂灵敏度不够。

返回列表